Analisis Ekspresi Gen Glu - 1Dx5 Pada Padi Fatmawati Generasi T3 dan T4 Serta Transformasi Gen Glu-1Dy10 Melalui Penembakan Partikel

---

Liberty. 2014. Analisis Ekspresi Cen Glu-I Dx5 Pada Padi Fatmawati
Cenerasi T3 dan T4 serta Transformasi Gen Glu-1DylO Melalui Penembakan
Partikel. Dibimbing oleh Murdaningsih Haeruman K., Nono Carsono, dan
Tri Joko Santoso

Analisis ekspresi gen Glu-fDx5 pada padi Fatmawati generasi T3 dan T4
serta transformasi gen Glu-l Dy l O melalui penembakan partikel dilakukan sebagai
upaya perakitan kultivar padi unggul yang menghasilkan tepung dengan kualitas
setara tepung gandum. Penelitian bertujuan untuk melihat stabilitas ekspresi gen
Glu-I Dx5 pada padi transgenik kultivar Fatmawati generasi T 3 dan T4 dengan RT­
PCR. untuk mentransfer gen Glu- f Dy 1 () dan meregenerasikan eksplan hasil
transformasi dan mendapatkan padi transgenik yang mengandung gen Glu- f Dy 10
dan terekspresi pada generasi T I berdasarkan karakter tinggi tanaman, panjang
malai, panjang leher malai, posisi daun bendera, tipe malai, bentuk ligula dan
warna ligula.

Percobaan dilakukan pada bulan Februari 2010 sampai Februari2013 di (i)
Laboratorium Genetic Engineering University of Tsukuba, Jepang, (ii)
Laboratorium Biologi Molekuler BB-Biogen. Bogor, (iii) Laboratorium Analisis
Tanaman Fakultas Pertanian Un pad, Jatinangor, dan Kebun Percobaan Fakultas
Pertanian Unpad, Jatinangor. Penelitian ini dilakukan dalam tiga tahap kegiatan
yang masing-masing terbagi ke dalam beberapa percobaan. Penelitian tahap
pertama meliputi kegiatan (ijanalisis eksprcsi gen Glu-I D.t5 padi Fatmawati
genersi T3 dengan RT-PCR, (ii ) deteksi gen Glu-I Dx5 padi Fauuawati genersi T4,
dan (iii) analisis ekspresi gen Glu-I Dx5 padi Fatmawati genersi T; dengan RT­
PCR. Penclitian tahap kcduarncliputi kcgiatan (i ) pcngujian daya regcncrasi tiga
genotip padi sccara III \ -it m. (1 i ) transformasi gen C; 1/1-1 Dv l () dengan
penembakkan partikcl. clan (lli) deteksi molekuler gcn Glu-I IJ.I'/Opada generasi
To. Pcnelitian tahap kctigarncliputi kcgiatan (i ) dctcksi molckulcr gcn Glu-lDyf()
padapadi Kitaake generas i T". (i i) eval uasi karaktertanaman gCll G!l/-I Dy I () padi
Kitaake generasi TI• dan (lii) analisis eksprcsi gen Glu-l Dvl O padi Kitaake
generasi T I dengan RT-PCR.

Berdasarkan analisis RT-PCR diperoleh tiga gaJur tanarnan padi kultivar
Fatmawati generasi T, yang mcngekspresikan gen Glu-l Dx5 yang ditunjukkan
dengan diperolehnya fragment produk peR yang sesuai dengan ukuran primer
spesifik yang digunakan (365bp dan 815bp).Analisis yang sarna juga dilakukan
pada generasi T 4dan hasilnya menunjukkan bahwa gen target dapat terekspresi
dengan baik.Penelitiantahapkedua dilakukan untuk mengetahui daya regeneiasi

kalus yang akan digunakan sebagai eksplan untuk transformasi. Pengujian daya
regenerasi kalus menunjukkan bahwa tidak terdapat interaksi tiga fa or (genotip

I

x kosentrasi ZPT x induksi) pada semua karakter yang diamati. Kalus padi

Kitaake yang diinduksi selama 7 hari dan Fatmawati selama 14 hari memberikan
hasil terbaik pada ukuran kalus. Umumnya, tiga genotip padi yang diuji mampu
beregenerasi membentuk tanaman, namun demikian genotip Kitaake memiliki
penampilan terbaik. Penggunaan media ta~pa tambahan ZPT (2,4-D) dengan
waktu induksi kalus 7 hari direkomendasikan untuk digunakan pada tahap induksi
kalus. Hasil percobaan transformasi gen menunjukkan bahwa daya regenerasi
yang tinggi diperoleh pada genotip Fatmawati dengan umur induksi 7 hari dan
jarak tembak 7cm dan serta genotip Kitaake dengan umur induksi 7 hari dengan
jarak tembak 9cm. Deteksi gen Glu-IDyIO yang dilakukan terhadap genotip
Kitaake generasi To menunjukkan bahwa gen yang disisipkan dapat terdeteksi
pada genom padi. Hal ini ditunjukkan dengan munculnya fragrnen produk PCR
berukuran 662bp. Tujuh belas genotip padi Kitaake generasi T 1 diketahui
mengandung gen Glu-IDyIO berdasarkan analisis PCR. Analisis terhadap
karakter tanaman menunjukkan bahwa tanaman transgenik memiliki penampilan
yang sama dengan genotip asalnya. Pengujian ekspresi gen pada 17 genotip
transgenik generasi T\!)menunjukkan terdapat I galu adi yang mengekspresikan
gen Glu-IDyIO. Hasil percobaan ini dapat menjadi dasar dalam pembentukan
kultivar unggul padi yang mampu menghasilkan tepung dengan kualitas baik.

---

Availability @Perpustakaan Pusat

No copy data

Detail Information

Series Title

-

Call Number

630 Lib A/R.15.32

Publisher

Bandung : PROGRAM PASCASARJANA UNPAD., 2014

Collation

xv,;138 hlm,;29 cm

Language

Indonesia

ISBN/ISSN

-

Classification

630 Lib A

Content Type

-

Media Type

-

Carrier Type

-

Edition

-

Subject(s)

-

Specific Detail Info

-

Statement of Responsibility

-

Other version/related

File Attachment

Comments

---

You must be logged in to post a comment