Text

4323- Isolasi dan Pemurnian Protein MPT64 (Mycobacterium Protein Tuberculosis 64) Ekstraseluler (Carla Florencia; Dr. Sri Agung Fitri Kusuma, M.Si; Prof. Dr. Toto Subroto, MS)

---

Protein MPT64 merupakan target protein yang digunakan pada pengembangan kit imunokromatografi untuk deteksi tuberkulosis. Penelitian ini dilakukan untuk produksi dan pemurnian protein MPT64 ekstraseluler. Protein ekstraseluler digunakan karena dapat diproduksi dalam jumlah besar dan lebih mudah penanganannya dibandingkan protein intraseluler. Protein MPT64 tidak memiliki fusi tag untuk pemurnian, sehingga metode pemurnian yang digunakan adalah elektroelusi. Overproduksi protein dilakukan dengan sistem ekspresi Eschericia coli, dengan menggunakan medium LB dua kali lipat serta dilakukan induksi dengan rhamnosa dengan konsentrasi 4 mM pada jam ke-5. Hasil overproduksi di karakterisasi dengan SDS-PAGE dan imunokromatografi. Selanjutnya pita ukuran 24 kDa hasil SDS-PAGE dikumpulkan dan dilakukan pemurnian dengan metode elektroelusi dan elusi pasif dengan variasi waktu (72 dan 96 jam) dan jumlah pita (6, 9, dan 12 pita). Hasil pemurnian yang diperoleh, elektroelusi dengan variasi 12 pita memiliki kadar tertinggi dengan rata-rata 1.830 mg/ml. Sedangkan untuk elusi pasif dengan variasi 96 jam dengan 12 pita memperoleh rata-rata kadar 53 mg/ml. Hasil pemurnian protein MPT64 ekstraseluler dengan metode elektroelusi tidak dapat dideteksi dengan SDS-PAGE dan imunokromatografi, sedangkan hasil pemurnian dengan metode elusi pasif dapat di deteksi dengan metode imunokromatografi. Berdasarkan perolehan kadar protein hasil pemurnian yang diperoleh, metode elektroelusi lebih efektif untuk pemurnian protein MPT64 ekstraseluler dibandingkan metode elusi pasif.
Kata kunci: Ekstraseluler, Escherichia coli, MPT64, elektroelusi, elusi pasif

---

Availability @Fakultas Farmasi

No copy data

Detail Information

Series Title

-

Call Number

4323

Publisher

Jatinangor : Fakultas Farmasi Universitas Padjadjaran., 2021

Collation

-

Language

Indonesia

ISBN/ISSN

-

Classification

4323

Content Type

-

Media Type

-

Carrier Type

-

Edition

-

Subject(s)

-

Specific Detail Info

-

Statement of Responsibility

-

Other version/related

File Attachment

Comments

---

You must be logged in to post a comment